目前,乙肝五項的檢測方法有三大類,一類是定性檢測,另外兩類是半定量檢測和定量檢測。
一、定性檢測
定性檢測有國產乙肝金標法或者采用酶聯免疫吸附測定(ELISA)法。定性檢測的結果是告訴個體體內有沒有乙肝表面抗原、乙肝表面抗體等指標。這種方法簡單、快速,成本較低,但是不夠精確靈敏,不能定量。特別是低濃度的標本,有時會漏診,因為沒有數值就無法動態(tài)觀察療效、評價治療效果。目前臨床上定性檢測已經不常用,現其主要用于體檢篩查等。對于乙肝患者來講,盡量使用半定量和定量的檢測方法,其結果能較為清楚地反應疾病的變化過程,為判斷預后提供依據。
二、半定量檢測
半定量和定量的檢測方法就是化驗單上標注的微粒化學發(fā)光法、電化學發(fā)光法等。酶聯免疫吸附法-ELISA法也可以進行半定量的檢測。半定量檢測化驗單上的單位是COI或者S/CO,它是一個數值,其主要原理是將測得的光密度結果(OD值)與一個臨界值(CUT OFF值)對比,比值越高代表乙肝表面抗原或者乙肝表面抗體等越高。半定量檢測在一定范圍內可比性較好,靈敏性、準確性比定性的檢測方法要高,可以大致反映抗原抗體的水平。但是檢測的比值結果不是精確的數字,也沒有線性關系,因此稱為半定量。
三、定量檢測
目前應用比較多的是定量檢測方法,其靈敏度、特異性好,主要針對乙肝表面抗原和抗體。例如HBsAg使用的單位是IU/mL,正常參考值是
定量檢測不僅可以很好地反映乙肝患者體內病毒的變化以及抗病毒治療的效果,而且能夠預測遠期療效。例如HBsAg水平越低,反映體內的ccc DNA、HBV DNA水平都比較低;抗病毒治療中HBsAg 水平下降越快,提示遠期預后較好;根據HBsAg的變化也可以預測HBeAg血清轉換率。因此,定量檢測方法被越來越多地應用于接受抗病毒治療的患者。
HBsAg的定量檢測可以反映HBV DNA的水平,但它還不能代替HBV DNA的檢測。臨床上可以對HBV DNA進行定量檢測——通過實時熒光定量聚合酶鏈反應PCR測定HBV DNA。進口試劑的檢測下限是小于20 IU/mL,國產試劑在臨床的應用也比較多,但標準低于進口試劑。PCR檢測方法先進,形式多種,如反轉錄聚合酶鏈反應RT-PCR可以對HCV RNA進行定量檢測。通過這種方法還可以進一步進行核酸序列的測定,檢測病毒基因型以及是否有耐藥基因的發(fā)生、乙肝病毒前C區(qū)的變異等。
定量檢測不僅能夠動態(tài)反映疾病的自然過程以及抗病毒治療的應答情況,而且可以預測療效,為是否停藥提供依據,因此受到了臨床醫(yī)師的重視,成為目前臨床應用多的方法。